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改善峰形,提升靈敏度,六大“金剛”齊亮相!

2024-03-19

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眾所周知,分析物損失一直都是色譜分析工作者面臨的一個(gè)重大挑戰(zhàn)。我們傳統(tǒng)的色譜柱柱管大多數(shù)是不銹鋼的,一些金屬敏感型分析物(典型的如圖1:磷酸化分子和羧化分子)會(huì)與金屬柱管表面發(fā)生特異性吸附,進(jìn)而導(dǎo)致色譜峰形差、靈敏度低和回收率不佳等諸多分析問(wèn)題。

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圖1. 金屬敏感型分析物示例

月旭科技推出的金剛石鍍層系列色譜柱采用高性能表面鍍層金剛石薄膜(DLC)技術(shù),能夠有效減少金屬相互作用造成的吸附損失。從而有效改善峰形、提升靈敏度和獲得更高的回收率。

該系列色譜柱對(duì)所有樣品均適用,尤其適用于分析一些對(duì)金屬敏感的化合物。

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(圖片來(lái)源:baotu)

前期推出的四款金剛石鍍層色譜柱在寡核苷酸、地塞米松磷酸鈉與腺嘌呤異構(gòu)體等樣品分析時(shí)展現(xiàn)出“低的吸附性、高的靈敏度、尖銳的色譜峰形”而深受客戶的青睞。

為進(jìn)一步滿足客戶的項(xiàng)目需求,拓寬金剛石鍍層系列色譜柱的應(yīng)用范圍,該系列色譜柱穩(wěn)步擴(kuò)增,六款新色譜柱于今日正式發(fā)布上市!

它們的加入可為您提供更多的選擇性,共同助力您在生物類(lèi)樣品(蛋白樣品等)及對(duì)金屬敏感的小分子樣品(如:含羧酸基團(tuán)的有機(jī)酸等,含磷酸基團(tuán)的硫胺素-磷酸酯等)分析。

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金剛石柱特點(diǎn)

1、柱管惰性,有效降低特異性吸附。

2、改善峰形,改善分離度。

3、基線更平,靈敏度更高。

4、大幅減少樣品殘留,減少色譜柱活化和鈍化時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率。

案例分享

在生物科學(xué)領(lǐng)域,體積排阻分離色譜(SEC)作為一種簡(jiǎn)單、穩(wěn)健的方法常用于蛋白質(zhì)的分離。SEC在理想色譜條件下不涉及樣品和固定相的相互作用。然而,在非理想色譜條件下,樣品與硅膠基質(zhì)或不銹鋼柱管之間都可能發(fā)生吸附作用,導(dǎo)致色譜靈敏度低的問(wèn)題。

采用高性能表面鍍層金剛石薄膜(DLC)技術(shù)的色譜柱可有效降低因柱管產(chǎn)生的樣品吸附,在分離牛血清白蛋白樣品時(shí),較常規(guī)不銹鋼柱管的色譜柱具有更出色的靈敏度(詳見(jiàn)案例1)。

應(yīng)用案例1 牛血清白蛋白(BSA)應(yīng)用檢測(cè)

色譜柱:

Xtimate? Bio SEC-300,(4.6×300mm,5μm,常規(guī)不銹鋼管);

Xtimate? DLC Bio SEC-300,(4.6×300mm,5μm,金剛石柱管)。

流動(dòng)相:150mM磷酸鹽(pH 6.80) ;

檢測(cè)波長(zhǎng):215nm;

柱溫:25℃;

流速:0.2mL/min;

進(jìn)樣量:10μL;

樣品濃度:50μg/mL。

重疊譜圖:

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含羧酸和磷酸基團(tuán)的樣品對(duì)金屬比較敏感,容易與不銹鋼柱管的表面發(fā)生吸附作用,導(dǎo)致色譜峰形不佳和靈敏度下降。采用惰性金剛石鍍層柱管的色譜柱較常規(guī)不銹鋼柱管的色譜柱在分析這些樣品時(shí)(羧酸化樣品:詳見(jiàn)案例2~3;磷酸化樣品:詳見(jiàn)案例4)展現(xiàn)出更高的靈敏度、更優(yōu)的峰形。使分析工作者更容易準(zhǔn)確積分和定量這些棘手化合物。

應(yīng)用案例2 六種有機(jī)酸應(yīng)用檢測(cè)

色譜柱:

Ultimate? Polar RP,(4.6×250mm,5μm,常規(guī)不銹鋼管);

Ultimate? DLC Polar RP,(4.6×250mm,5μm,金剛石柱管)。

流動(dòng)相:20mM 磷酸氫二鉀用磷酸調(diào)節(jié)pH到2.7/乙腈=75/25;

檢測(cè)波長(zhǎng):254nm;

柱溫:25℃;

流速:1.0mL/min;

進(jìn)樣量:20μL;

樣品溶液配置: 

稱取硫脲 0.0253g、2-氰基苯甲酸0.0248g、2-羥基苯甲酸0.0248g、鄰苯二甲酸0.0255g、2-硝基苯甲酸0.0250g、4-羥基苯甲酸0.0258g,用水定容到100mL。

重疊譜圖:

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應(yīng)用案例3 全杜仲膠囊中的綠原酸應(yīng)用檢測(cè)

色譜柱:

Ultimate? ALK C18,(4.6×250mm,5μm,常規(guī)不銹鋼管);

Ultimate? DLC ALK C18,(4.6×250mm,5μm,金剛石柱管)。

流動(dòng)相:1%冰醋酸溶液/乙腈=90/10;

檢測(cè)波長(zhǎng):327nm;

柱溫:30℃;

流速:1.0mL/min;

進(jìn)樣量:10μL;

樣品溶液配置:

1) 稀釋液:水;

2) 再溶溶液:取裝量差異下的本品內(nèi)容物,混勻,研細(xì),取約0.48g,加入50%甲醇50mL, 超聲處理(功率500W,頻率40kHz)45分鐘,放冷,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

重疊譜圖:

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應(yīng)用案例4 硫胺素-磷酸酯應(yīng)用檢測(cè)

色譜柱:

Ultimate? AQ-C18,(4.6×250mm,5μm,常規(guī)不銹鋼管);

Ultimate? DLC AQ-C18,(4.6×250mm,5μm,金剛石柱管)。

流動(dòng)相:80mmol/L 碳酸氫銨溶液/甲醇=95/5;

檢測(cè)波長(zhǎng):235nm;

柱溫:30℃

流速:1.0mL/min;

進(jìn)樣量:20μL;

樣品溶液配置:取本品10mg,加流動(dòng)100mL,制成每1mL含100μg的溶液。

重疊譜圖:

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推薦

建議對(duì)金屬敏感樣品的分析(如:磷酸化和羧化分析物)。

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產(chǎn)品信息

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