液相色譜方法開發(fā)過程中，樣品的紫外吸收波長對開發(fā)結(jié)果具有舉足輕重的影響。對于許多樣品而言，只有仔細(xì)選擇合適的檢測波長，才能得到良好的分離效果。選擇波長時需了解各樣品組分的UV光譜，若能取得被測物的標(biāo)準(zhǔn)品，可較快獲得各樣品組分的UV圖譜，應(yīng)用DAD還可獲得大量的其他補(bǔ)充信息。

1、不光考慮目標(biāo)物的更大吸收波長，同時要考慮樣品干擾物吸收值更小的波長。

2、飽和烴類以及其氨基或氰基衍生物是僅有的一類完全不適合UV檢測的有機(jī)化合物。

3、被特定基團(tuán)（-O-、-OH、-Cl、-COOH、-COOR）取代的飽和烴類具有臨界吸收值，可能需在短波長處（185-210nm）檢測。

4、除上述幾類化合物外，一般化合物都能在較長波長（>210nm）檢測。下表列出各種官能團(tuán)的更大波長與摩爾吸收系數(shù)。

5、流動相組分的紫外本底吸收。此項考慮涉及到溶劑的種類選擇、流動相pH選擇以及流動相緩沖鹽選擇等。有些酸有紫外本底，如甲酸，乙酸；有些沒有，如磷酸。這樣，在使用較低波長檢測的方法時，就要考慮使用紫外本底小的酸。冰醋酸在短波長檢測下應(yīng)該慎用。水在180nm以上實際無吸收，可忽略其影響。正相色譜所用溶劑的吸收度通常更強(qiáng)，所以一般需在長波長檢測。