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2022-09-29
做樣目的:客戶(hù)有原始方法,但雜峰多,分離不好,DAD純度達(dá)不到要求。起始要求是篩選合適的色譜柱。
存在問(wèn)題:主成分與前相鄰峰的分離度不是很好,濃度增大的情況下,分離度容易不合格。而原方法中,主成分保留弱,有機(jī)相的起始比例已經(jīng)為0,為1OO%純水相條件,除了篩柱子,方法沒(méi)有優(yōu)化空間。因此,確定進(jìn)行完全的方法開(kāi)發(fā)。
麥角硫因結(jié)構(gòu)式: 方法開(kāi)發(fā)思路: 從結(jié)構(gòu)看,物質(zhì)應(yīng)該偏堿性,原標(biāo)準(zhǔn)中,客戶(hù)流動(dòng)相pH6-7之間,且起始比例已為純水相,麥角硫因出峰在純水相段,方法已沒(méi)有優(yōu)化空間。與客戶(hù)進(jìn)行溝通,客戶(hù)接受完全的方法開(kāi)發(fā)。 結(jié)構(gòu)中有羧基和氨基,增加保留能力可以選用加離子對(duì)的方式。羧基可以選用四丁基銨類(lèi)的離子對(duì),氨基可選擇磺酸類(lèi)的離子對(duì)或三氟乙酸,七氟丁酸等離子對(duì)試劑。考慮到為中藥制劑,成分復(fù)雜,需要加后梯度用高比例有機(jī)相洗脫強(qiáng)保留雜質(zhì),磺酸類(lèi)離子對(duì)和四丁基銨類(lèi)離子對(duì)平衡慢,而且走梯度鬼峰的概率大,而三氟乙酸的離子對(duì)作用較弱,延長(zhǎng)保留的能力有限,因此選用七氟丁酸做為添加劑,來(lái)增強(qiáng)麥角硫因的保留。
由圖可見(jiàn),在流動(dòng)相中增加一定比例的七氟丁酸后,麥角硫因保留明顯增加,且前后都沒(méi)有明顯的雜質(zhì)干擾。