疏水作用是指水介質中球狀蛋白質的折疊總是傾向于把疏水殘基埋藏在分子內部的現(xiàn)象。疏水作用及疏水和親水的平衡在蛋白質結構與功能的方方面面都起著重要的作用。1959年，Kauzmann在《蛋白質化學進展》上發(fā)表了一篇題為“影響蛋白質變性的一些因素”的文章，shou次明確提出“疏水作用”這一概念。在當時，生物化學家已經知曉蛋白質中含有α螺旋和β折疊；一些蛋白質和多肽的序列已經測定；但是蛋白質的立體結構還正在測定中。與此同時，Tanford等為疏水作用的存在提供了實驗數(shù)據(jù)。從此以后，疏水作用的概念被蛋白質化學家所接受。目前，不同實驗室對20種氨基酸的疏水特性分別提出了不同的參數(shù)。對一個蛋白質肽鏈中的每個氨基酸殘基也通常使用親/疏水作圖法(hydropathy)描述。通過親/疏水作圖法可以了解整條肽鏈中不同肽段的親/疏水性，進而可以對一些處于蛋白質分子表面的抗原決定簇及一些膜蛋白中穿越膜的肽段進行預測。

疏水作用的本質來源于熵力，一個孤立系統(tǒng)出現(xiàn)平衡態(tài)是熵和能量兩方面達到更佳折衷的產物?？计澛╓.Kauzmann）1959年指出為了減少暴露在水中的非極性表面積，任何兩個在水中的非極性表面積將傾向于結合在一起。疏水溶劑化的代價大部分源于熵，疏水效應顯著的熵特性，這暗示著隨溫度增高疏水效應的增強（前提是溫度不得破壞水中氫鍵的情況下，氫鍵破壞越多疏水表面對氫鍵形成干擾越小，疏水效應減弱）。與排空效應是類似的疏水效應能夠利用熵呈現(xiàn)出分子的自組裝。

疏水相互作用層析（hydrophobic interaction chromatography，HIC）依賴于生物大分子表面疏水性不同來分離生物大分子的一種方法。蛋白質和多肽等生物大分子的表面常常暴露著一些疏水基團，高鹽情況下，蛋白表面的疏水基團被暴露，通過與配基的疏水相互作用結合而被吸附；當鹽濃度下降，蛋白表面的水化層增加，使得疏水相互作用減弱，從而實現(xiàn)蛋白解吸。多數(shù)情況下抗體的疏水性要強于大部分雜質組分，因此 HIC 可作為精制步驟用于抗體純化，HIC介質的疏水性對抗體產品的收率和雜質去除效果有較大影響。

·影響疏水層析的因素·

*蛋白質的疏水性強弱取決于其表面疏水基團的分布。

*鹽的種類及濃度，組成緩沖液中鹽的某些離子對蛋白質的構象有穩(wěn)定作用，如SO42-可提高蛋白結構的穩(wěn)定性，使蛋白的溶解度下降，對蛋白有鹽析效應，使蛋白同配基間疏水作用增強。還有些離子對于蛋白質構象具有不穩(wěn)定作用，如Cl-、Ca2+可增加蛋白質的溶解度，這類離子洗脫能力較強。鹽析和鹽溶的特性可作為選擇疏水介質平衡和洗脫條件的依據(jù)，常用的疏水配基的疏水性強弱和疏水作用離子排列如下：

*疏水層析過程中，溫度升高，疏水作用增強，有利于提高層析柱的分離度，但對于生物活性物質來說，高溫條件會使其變性失活，因此疏水層析通常在常溫或者低溫中進行，建議維持室溫。

*疏水層析流動相的pH通常為中性的磷酸鹽緩沖液。蛋白質同疏水基團的作用力隨pH升高而降低，因為蛋白質的酸性基團隨pH升高所帶電荷逐漸增多，親水性增強。但在疏水層析中通常不采用改變溶液的pH來改變蛋白質的疏水性。

月旭現(xiàn)推出了快流速瓊脂糖基架疏水層析介質，Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF 快流速瓊脂糖基架疏水層析介質。

Phenyl Tanrose 6FF屬于芳香族疏水介質，疏水性更強。根據(jù)配基取代程度不同分為：高取代（High Sub簡稱HS）和低取代（Low Sub簡稱LS）兩種介質。苯基通過不帶電，化學性質穩(wěn)定的醚鍵連接到瓊脂糖上。

Butyl Tanrose 4FF和Octyl Tanrose 4FF這兩種介質屬于脂肪族疏水介質，Butyl Tanrose 4FF配基為丁基，Octyl Tanrose 4FF配基為辛基：這兩種配基通過不帶電且化學穩(wěn)定性的醚鍵同高度交聯(lián)的瓊脂糖偶聯(lián)而成。

Butyl-S Tanrose 6FF是疏水性更弱的疏水介質，適合在較低鹽濃度條件下純化強疏水性分子，可去除脂肪類、脂蛋白、色素等，在酵母重組表達乙肝疫苗純化過程中發(fā)揮重要作用。

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