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制備型色譜柱選擇指南

2021-02-02

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很多小伙伴對(duì)選擇一根合適的制備柱而困擾,本文介紹了制備型色譜柱的一些選擇要點(diǎn)。

什么是制備型色譜柱

制備的目的是從混合物中得到純物質(zhì),即分離-純化-目標(biāo)物,制備柱則是完成這一過程的工具。制備柱固定相種類和分析柱類似,制備柱的特點(diǎn)是:

1、柱長(zhǎng)短,內(nèi)徑大
為了加快分離時(shí)間和提高分離效率,制備色譜的進(jìn)樣品量會(huì)很大,一般制備柱柱長(zhǎng)為50mm-250mm,而內(nèi)徑為10mm-50mm。

2、流速高
流動(dòng)相流速一般在10-20ml/min,可以提高產(chǎn)率,降低生產(chǎn)成本。

如何選擇一款合適的制備柱

第一步:選擇合適的鍵合相

目前市場(chǎng)需求來看,蛋白質(zhì)、多肽等類的物質(zhì)分離純化十分普遍,其中以C18、C8、C4的鍵合相居多,月旭科技提供完整的鍵合相產(chǎn)品線。

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第二步:選擇合適的填料粒徑和孔徑
根據(jù)化合物的性質(zhì)來選擇合適的填料粒徑和孔徑
由分子量選擇合適的孔徑

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由壓力耐受性和分離難度來選擇合適的粒徑

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第三步:由上樣量大小和樣品特性選擇合適的柱管 

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 第四步:確定合適的流速和上樣量

制備柱的流速一般與直徑的平方成正比,舉例:4.6mm分析柱流速為1ml/min,則10mm制備柱約為4.7ml/min。


 

上樣量選擇過載上樣,特點(diǎn)是節(jié)約溶劑、節(jié)省時(shí)間、增加柱子的使用率,但是過載越多,分離度越差,一般以目標(biāo)化合物與雜質(zhì)分離度1.5為標(biāo)準(zhǔn)。上樣量可以依據(jù)下式計(jì)算:

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Ultimate?系列制備柱

 

采用與分析柱所用填料完全相同,保證了分析規(guī)模和制備規(guī)模的良好重現(xiàn)性,支持直線放大;獨(dú)特的裝柱技術(shù)和全不銹鋼的modular柱管,保證了柱床的穩(wěn)定性,經(jīng)過測(cè)試10μm理論塔板數(shù)>35000/m,5μm理論塔板數(shù)>75000/m,峰的對(duì)稱性值為0.95~1.20;還有上樣量高、支持線性放大、制備時(shí)間短、節(jié)約溶劑等特點(diǎn)。

更好的柱效和封尾

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更好的分離效率、易于線性放大

不同內(nèi)徑的柱子能得到同樣完美分離

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