色譜柱壽命不理想的問題一直困擾著眾多實驗室的小伙伴們，針對各品牌色譜柱的壽命表現(xiàn)均低于它們的普遍壽命的情況，不少小伙伴紛紛表示其玻璃心不堪色譜柱年輕即逝的打擊。對此，月旭科技為您仔細(xì)研究了色譜柱的“長生不老”之術(shù)，解決色譜柱壽命不理想的問題，話不多說，快跟隨小編腳步一起往下看吧！

1、樣品組分吸附在色譜柱的前端

a、可能是由于樣品在流動相中的溶解度低而沉淀出來的；

b、樣品中有強(qiáng)保留物質(zhì)（與鍵合相極性相似的物質(zhì)）；

c、樣品或者流動相中與填料表面發(fā)生微弱的不可預(yù)知的化學(xué)反應(yīng)；

d、樣品溶劑本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近，而且進(jìn)樣體積較大（內(nèi)徑4.6mm，上樣體積在 50μl 以上）。

通常這樣的情況伴隨柱壓升高；或者柱壓正常，一個色譜圖中出現(xiàn)有些峰形異常，有些峰形正常的情況。

a、 盡量從根源上解決問題，選擇合適的樣品前處理技術(shù)，去除掉強(qiáng)保留物質(zhì)，獲得更加“干凈”更加成分單一的樣品；

b、 使用保護(hù)柱，保護(hù)柱的選擇盡量與分析柱同等填料，同等鍵合方法的保護(hù)柱，如果使用不同品牌填料、不同裝填工藝的保護(hù)柱，在分離能力和保護(hù)方面可能得不到更好的效果，也不要使用更大粒徑的保護(hù)柱，更大粒徑或者裝填較差的保護(hù)柱會因為它的峰展寬作用而導(dǎo)致分離能力下降。

2、流動相“臟”了

流動相在色譜柱中的使用量比樣品要大得多，不停的沖刷色譜柱，如果流動相變質(zhì)或者有其他的污染物，那對色譜柱的污染會比樣品更大，色譜柱對流動相反而是一種凈化，而且在運(yùn)行梯度時，還會出現(xiàn)鬼峰。

a、流動相配置后盡快使用，更多不超過 12 小時；

b、有機(jī)相和鹽相混合的流動相，更容易導(dǎo)致鹽的析出，盡量使用在線混合，且在運(yùn)行梯度時變化速率不宜太快，避免鹽析出；

c、用專業(yè)的經(jīng)過鈍化處理過的溶劑瓶裝流動相，切忌不能使用塑料瓶，做好密封，在更換流動相的時候同時更換試劑瓶；

d、水在接觸空氣或者離開制水設(shè)備以后會出現(xiàn)變質(zhì)，現(xiàn)用現(xiàn)制，打開后盡快使用。

a、流動相中的鹽，尤其是磷酸類的緩沖鹽，對硅膠的攻擊是較強(qiáng)的；

b、高柱溫，加快鹽運(yùn)動的速率；

c、高氧，流動相中未排除的氧，會加快硅膠內(nèi)部鍵的斷裂；

d、高pH（＞8），OH 根離子攻擊硅膠內(nèi)部的 Si-O-Si 鍵，導(dǎo)致硅膠直接破碎；

e、低 pH（＜2），H 根離子攻擊硅膠表面的 Si-C 鍵，鍵合相脫落以后，硅膠裸露出來；

f、高水，也是引起鍵合相水解硅膠裸露的重要誘因。

a、使用鹽的時候，柱溫 ≤30℃；

b、鹽的濃度使用在 50mmol 以下；

c、使用在線脫氣機(jī)或者超聲脫氣（10 分鐘，時間太久會發(fā)熱導(dǎo)致流動相成分改變）；

d、除了特殊標(biāo)注，色譜柱的使用 pH 值在 2-8 之間，如果樣品溶解的 pH 較苛刻，請使用保護(hù)柱來抵御 pH 所帶來的損傷，并及時更換；

e、不要把未標(biāo)注能耐受純水的色譜柱使用在水相大于 95% 的流動相條件下。

本期為您帶來色譜柱的“長生不老”修煉之術(shù)上篇，敬請期待下期內(nèi)容，看色譜柱在“長生不老”路上，如何找到老化原因，并一一解決。