流動(dòng)相 | 保質(zhì)期

各位老師知道流動(dòng)相的保質(zhì)期有多久嗎，經(jīng)常遇到有老師前來咨詢“咱們的流動(dòng)相能放多久啊，放一星期沒事吧”。但是老師，您知道嗎，流動(dòng)相放的時(shí)間太長，可是會(huì)直接影響您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果呢。在這里就給各位老師說道說道流動(dòng)相的注意事項(xiàng)。

流動(dòng)相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi)，不能貯存在塑料容器中。因許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導(dǎo)致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統(tǒng)，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán)，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動(dòng)相。

磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用，不要貯存。如確需貯存，可在冰箱內(nèi)冷藏，用前應(yīng)重新濾過。容器應(yīng)定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長的微生物。

流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進(jìn)入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時(shí)，或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡，會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢，檢測器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。

流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機(jī)溶劑混合時(shí)，混合液變化大，往往會(huì)與室溫相差很大，務(wù)必注意。

五：避免使用帶有腐蝕性流動(dòng)相流動(dòng)相含有濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、二氯甲烷、丙酮、四氫呋喃、二甲亞砜等溶劑，會(huì)對流路中的PEEK樹脂管路強(qiáng)度變差、PEEK樹脂管容易破裂使溶劑外濺。流動(dòng)相含有鹵素離子的溶劑，如KCl、NaCI、NH4CI等。對流路中的不銹鋼材料有腐蝕作用，以上的溶劑須盡量避免使用。非用不可時(shí)，分析完了后，應(yīng)立刻用蒸餾水把全流路清洗干凈。

所謂的pH值，是基于水為溶劑的體系才叫pH值，所以正確的調(diào)節(jié)緩沖溶液pH值的做法是在水溶液中進(jìn)行。如果添加了有機(jī)溶劑后再測量pH值，這其實(shí)與添加之前測量的pH值會(huì)有所不同。

然而，更重要的一點(diǎn)是操作習(xí)慣要保持一致。如果習(xí)慣是在添加有機(jī)溶劑之后測量pH值，那只要確保每次的操作都是如此就可以了。雖然這樣操作不是1OO%的準(zhǔn)確，但至少它與之前的做法是一致的。這對于一個(gè)完整的研究來說，相較之你在添加有機(jī)溶劑之前測量pH值而獲得了一次準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)來說，保持一致的操作方法可能會(huì)更重要。

假如流動(dòng)相準(zhǔn)備的不夠充足，除了存在一定的泵和色譜柱空運(yùn)行的風(fēng)險(xiǎn)外，還會(huì)有其它的問題存在。如由于溶液中水會(huì)從試劑瓶的上方蒸發(fā)，所以試劑瓶頂部流動(dòng)相的成分已經(jīng)發(fā)生了改變。如果使用了瓶中更后這部分試劑，事實(shí)上它們就是原來試劑瓶中頂部的那部分，當(dāng)它們通過色譜柱時(shí)可能會(huì)有渣滓滯留在色譜柱中。

超聲法對于確保所用的緩沖鹽完全溶解很有效，但它不是更有效的脫氣方法，而且由于超聲時(shí)溶液會(huì)快速升溫而導(dǎo)致流動(dòng)相中有機(jī)試劑蒸發(fā)。為了節(jié)省時(shí)間，可以花5min時(shí)間通過真空過濾機(jī)來過濾流動(dòng)相，這可以一步達(dá)到脫氣和過濾的兩個(gè)目的。